Thermo Scientific™ Kit d’isolement de mitochondries pour cellules en culture

En règle générale, l’isolement des mitochondries est un procédé laborieux qui exige le traitement d’un échantillon unique par homogénéisation Dounce. Le kit d’isolement de la mitochondrie utilise un réactif non mécanique, qui permet le traitement simultané de plusieurs (six) échantillons de cellules mises en culture en 40 minutes environ. Les culots de cellules de mammifères mises en culture sont lysés délicatement avec une formulation exclusive, qui se solde par un rendement maximal des mitochondries avec une intégrité à peine compromise. Les instructions sur le produit décrivent comment optimiser la pureté par rapport au rendement. Le kit offre également une procédure optimisée d’homogénéisation Dounce, qui se solde par une récupération des mitochondries deux fois plus importante par rapport au recours du réactif. Les deux méthodes reposent sur la centrifugation différentielle pour séparer les fractions mitochondriales et cytosoliques avec une microcentrifugeuse de paillasse. Elles durent environ 40 minutes (récolte cellulaire postérieure). Une fois isolées, les mitochondries peuvent être utilisées dans les applications en aval, comme l’apoptose, la transduction de signal et les études métaboliques. Elles soutiennent aussi les efforts déployés en protéomique mitochondriale.

Points clés :

• Rapide :permet d’isoler des mitochondries intactes à partir de 2 × 10⁷ cellules en environ 40 minutes (après récolte des cellules)

• Flexible : permet de traiter plusieurs échantillons en même temps avec la méthode à base de réactifs, ou d’obtenir le rendement le plus élevé possible avec la méthode par homogénéisation de Dounce

• Optimisable : les consignes fournies permettent d’optimiser la pureté par rapport au rendement avec la méthode à base de réactifs

• Adapté aux applications de paillasse : l’isolement est réalisé dans un tube à microcentrifugeuse

• Compatible : les mitochondries isolées peuvent être lysées avec un détergent ou traitées pour presque toutes les applications en aval, y compris l’électrophorèse 2D

Comprend :

Trois solutions tampons et de détergent pour un volume total d’approximativement 115 ml