Thermo Scientific™ Kit de mutagénèse dirigée Phusion

Description

Le kit de mutagenèse dirigée Phusion est un outil polyvalent et efficace pour réaliser des mutations ponctuelles, des insertions ou des suppressions dans tous les types d’ADN plasmides. Grâce à ce kit, le plasmide complet est amplifié à l'aide d'amorces phosphorylatées qui introduisent les changements désirés. Le produit PCR linéaire amplifié, contenant la mutation souhaitée, est circularisé par ligation rapide (5 minutes) à l’aide de la ligase d’ADN T4. Le plasmide résultant peut ensuite être transformé dans n’importe quelles cellules E. coli compétentes.

Points clés

• Méthode d'amplification exponentielle robuste et fiable
• Aucune exigence particulière (concernant des vecteurs spéciaux, des sites de restriction ou un état de méthylation donné) pour le plasmide cible
• Destruction du modèle de départ au cours d'une étape distincte non nécessaire
• L’ADN polymérase haute fidélité Phusion Hot Start II réduit au maximum les mutations secondaires indésirables
• Amplification des plasmides de grande taille (jusqu’à 10 kb)
• Grâce à la modification du démarrage à chaud, la polymérase empêche l’amplification des produits non spécifiques et la dégradation indésirable des amorces avant le premier cycle de PCR
• Ligase d’ADN T4 fournie dans le kit ; aucune étape de purification nécessaire avant ou après la ligation
• Compatible avec toutes les souches de cellules E. coli compétentes