Invitrogen™ Kit de viabilité bactérienne LIVE/DEAD™ BacLight™

Description

The LIVE/DEAD BacLight Bacterial Viability Kits are convenient and easy-to-use kits for monitoring the viability of bacterial populations based on the membrane integrity of the cell. These kits provide a two-color fluorescence assay of bacterial viability for a diverse array of bacterial genera. Cells with a compromised membrane that are dead or dying will stain red with propidium iodide, whereas cells with an intact membrane will stain green with SYTO™ 9. These kits enable researchers to differentiate between live and dead bacteria within minutes, even in mixed populations with diverse bacterial types through fluorescent imaging, flow cytometry, and microplate assays.

Les kits de viabilité bactérienne LIVE/DEAD BacLight utilisent des mélanges de notre colorant d’acide nucléique vert fluorescent SYTO™ 9 et du colorant d’acide nucléique rouge fluorescent, l’iodure de propidium. Ces colorations diffèrent à la fois dans leurs caractéristiques spectrales et dans leur capacité à pénétrer des cellules bactériennes saines. Lorsqu’il est utilisé seul, le colorant SYTO— 9 marque généralement toutes les bactéries d’une population : celles qui ont des membranes intactes et celles qui ont des membranes endommagées. Cependant, l’iodure de propidium pénètre uniquement les bactéries avec des membranes endommagées, provoquant une réduction de la fluorescence du colorant SYTO 9 lorsque les deux colorants sont présents.

Les kits de viabilité bactérienne LIVE/DEAD Bac Light ont été soigneusement testés avec une variété d’organismes et dans plusieurs conditions. Les kits sont idéaux pour la microscopie par fluorescence, car les cellules actives (fluorescentes vertes) et mortes (fluorescentes rouges) peuvent être vues séparément. Ils conviennent également à une analyse quantitative avec un fluorimètre, un lecteur de microplaques à fluorescence, un cytomètre en flux ou un autre instrument.

Les méthodes traditionnelles d’évaluation de la viabilité des bactéries reposent sur des caractéristiques métaboliques ou l’intégrité de la membrane. Cependant, en raison des différences de morphologie, de cytologie et de physiologie entre les nombreux gènes bactériens, le développement d’un test de viabilité à numération directe universellement applicable a été difficile. Les kits de viabilité bactérienne LIVE/DEAD BacLight basés sur l’intégrité de la membrane permettent aux chercheurs de distinguer de manière fiable les bactéries vivantes et mortes facilement et quantitativement en quelques minutes, même dans une population mixte avec divers types bactériens.

Le kit de viabilité bactérienne LIVE/DEAD BacLight est disponible dans trois formats différents :

Kit de viabilité bactérienne LIVE/DEAD BacLight, pour microscopie (réf. catalogue L7007)
Le kit de viabilité bactérienne LIVE/DEAD BacLight pour la microscopie comprend deux solutions différentes prémélangeées ; du SYTO 9 et de l’iodide de propidium (IP) dans 300 μl de DMSO. Les colorants fluorescents sont mélangés à différentes proportions dans chacun : composant A – 1,67 mM SYTO 9 & 1,67 mM IP, composant B – 1,67 mM STYO 9 & 18,3 mM IP. Ce kit est disponible pour les clients qui ont déjà développé des protocoles en utilisant la formulation de colorant prémélangé.

Kit de viabilité bactérienne LIVE/DEAD BacLight pour la microscopie & les analyses quantitatives (réf. catalogue L7012)
Le kit de viabilité bactérienne LIVE/DEAD BacLight pour la microscopie & les analyses quantitatives comprennent deux solutions distinctes ; les colorants SYTO 9 (3,34 mM) et d’iodide de propidium (20 mM) dans 300 μl de DMSO. Les composants de marquage distincts permettent une optimisation flexible et facilitent l’étalonnage de la fluorescence bactérienne pour les procédures quantitatives.

Kit de viabilité bactérienne LIVE/DEAD BacLight (réf. catalogue L13152)
Pour plus de commodité, le kit de viabilité bactérienne LIVE/DEAD BacLight contient 10 paires des colorants distincts SYTO 9 et d’iodide de propidium prémesurés dans des pipettes de transfert en polyéthylène scellées En plus de l’emballage pratique dans les pipettes scellées, les colorants fluorescents sont fournis secs, sans DMSO ni autres solvants. Cette formulation ne nécessite pas de réfrigération et reste stable à des températures ≤–20°C une fois reconstitué.

Ces trois kits sont fournis avec 10 ml d’huile de montage BacLight pour les bactéries immobilisées sur les membranes. L’indice de réfraction à 25°C est de 1,517 ± 0,003.

Tout tampon physiologique compris entre un pH de 7,0 et 8,0, y compris le PBS, peut être utilisé pour diluer les colorants SYTO pour la solution de coloration.

Aux dilutions et volumes de réactifs recommandés, les kits L7007 et L7012 contiennent suffisamment de matériel pour effectuer ≥ 1000 tests individuels sur des plaques 96 puits, beaucoup plus de tests par microscopie par fluorescence ou environ 200 tests par cytométrie en flux.

Dans le kit L13152, chaque paire d’applicateurs contient suffisamment de colorant pour effectuer 50 tests individuels sur une plaque 96 puits, environ 1000 tests par microscopie par fluorescence ou 10 tests par cytométrie en flux.

Les kits de viabilité bactérienne LIVE/DEAD BacLight ont été testés sur les espèces bactériennes suivantes : Bacillus cereus, B. subtilis, Clostridium perfringens, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Micrococcus luteus, Mycobacterium phlei, Pseudomonas aeruginosa, P. syringae, Salmonella oranienburg, Serratia marcescens, Shigella sonnei, Staphylococcus aureus et Streptococcus pyogenes. Tous ces types de bactéries ont montré une bonne corrélation entre les résultats obtenus avec les kits de viabilité bactérienne LIVE/DEAD BacLight et ceux obtenus avec la numération plaquettaire standard.

Ces tests ont été effectués sur des cultures d’organismes à croissance logarithmique. De plus, nous avons reçu des rapports favorables de chercheurs ayant utilisé ces kits avec : Agrobacterium tumefaciens, Edwardsiella ictaluri, Eurioplasma eurilytica, Lactobacillus sp., Mycoplasma hominus, Propionibacterium sp., Proteus mirabilis et Zymomonas sp.

Order Info

Conditions d’expédition : Température ambiante Cette formulation de coloration ne requiert pas de réfrigération et est chimiquement stable même dans des conditions médiocres.