Invitrogen™ EnzChek™ Reverse Transcriptase Assay Kit

Description

Le kit de test de transcriptase inverse EnzChek est un test pratique, efficace et peu coûteux pour mesurer l’activité de la transcriptase inverse et pour le criblage des inhibiteurs de la transcriptase inverse. En moins d’une heure, les échantillons peuvent être lus dans un fluorimètre ou un lecteur de microplaques avec des ensembles de filtres adaptés à la fluorescéine (FITC), aux protéines vertes fluorescentes (GFP) ou à Alexa Fluor 488.

Les caractéristiques du kit de test de la transcriptase inverse EnzChek sont les suivantes :
• Détection à partir de 0,02 unités de transcriptase inverse du VIH-1
• Large plage de test dynamique, détectez jusqu’à une plage linéaire d’un facteur de 50
• Test simple à utiliser, adapté aux applications de criblage automatisé à haut débit

Le kit de test de la transcriptase inverse EnzChek utilise le réactif PicoGreen, qui détecte préférentiellement les hétéroduplexes d’ADN-ds ou d’ADN-ARN sur des acides nucléiques à simple brin ou des nucléotides libres. Dans ce dosage, l’activité de la transcriptase inverse dans un échantillon biologique génère des hétéroduplexes ARN-ADN longs à partir d’un mélange d’un long modèle poly(A), d’un amorceur oligo-dT et de dTTP. Les hétéroduplex ARN-ADN formés sont ensuite détectés par le réactif PicoGreen

. La transcriptase inverse est une enzyme qui fonctionne comme une ADN-polymérase dépendante de l’ARN pour synthétiser l’ADN à partir d’un modèle d’ARN. Les rétrovirus tels que le VIH utilisent l’activité de la transcriptase inverse pour fabriquer une copie de l’ADN de leur ARN viral à insérer dans le génome d’une cellule hôte. Les enzymes transcriptases inverses sont également utilisées dans diverses fonctions cellulaires, telles que l’enzyme télomérase, qui maintient la longueur des télomères et la stabilité des chromosomes et joue un rôle dans le cancer et le vieillissement. En biologie moléculaire, la fonction de la transcriptase inverse est utilisée pour générer des bibliothèques d’ADN complémentaire (ADNc) à partir de l’ARNm et quantifier l’expression de l’ARNm par amplification via RT-PCR.

Le kit de test de la transcriptase inverse EnzChek est une méthode simple pour déterminer l’activité de la transcriptase inverse qui est utile dans l’étude des rétrovirus et le criblage des inhibiteurs de la transcriptase inverse, qui peuvent fonctionner comme des médicaments thérapeutiques pour cibler les maladies rétrovirales. Étant donné que cette méthode est plus rapide et moins onéreuse que les tests isotopiques standard ou les tests immunologiques, elle convient à l’analyse d’un grand nombre d’échantillons biologiques, ce qui permet un criblage automatisé à haut débit des inhibiteurs de la transcriptase inverse.

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