Thermo Scientific™ DyLight™ 488 Maleimide

Les colorants Thermo Scientific™ DyLight™ ont des spectres d’absorption allant de 350 à 770 nm. Ces réactifs émettent une fluorescence sur une large gamme de pH, sont plus intenses que les colorants Alexa Fluor™ ou Cy™ dans de nombreuses applications, et correspondent aux longueurs d’onde de sortie des instruments à fluorescence les plus répandus. En outre, la solubilité dans l’eau des réactifs DyLight permet d’obtenir un rapport fluorochrome/protéine élevé sans précipitation pendant la conjugaison.
Les colorants réactifs aux sulfhydryles contiennent des groupes maléimide qui réagissent principalement avec les groupes –SH libres à pH 6,5–7,5, formant une liaison thioéther stable. À pH 7, le groupe maléimide est ∼ 1 000 fois plus réactif envers un sulfhydryle libre qu’envers une amine.1 À des valeurs > pH 7,5, la réactivité envers les amines primaires augmente et une hydrolyse du groupe maléimide peut se produire.

Points clés :

• Spécifiques : les colorants activés par maléimide marquent les protéines et d’autres molécules au niveau de sulfhydryles réduits (-SH)
• Méthodes de marquage efficaces — une chimie bien caractérisée et des protocoles optimisés permettent un marquage fiable et de haute qualité
• Procédure de marquage des anticorps optimisée — protocole complet pour la réduction et le marquage des IgG, ainsi que le calcul de l’efficacité du marquage

Applications :

• Marquage des anticorps pour les applications d’immunofluorescence, notamment l’immunocytochimie (ICC), l’immunohistochimie (IHC), les western blots et les dosages ELISA
• Marquage des macromolécules cibles pour les stratégies de détection fluorescente in vitro et in vivo