Invitrogen™ Test de prolifération cellulaire CyQUANT™ NF

Description

Since the amount of DNA in cells is highly regulated, methods to detect DNA content offer improved accuracy over metabolism-based cellular proliferation or cytotoxicity assays, which can be affected by cell changes that are unrelated to cell number. CyQUANT cell proliferation assays use cell-permeant, DNA-binding dyes that enhance fluorescence when bound to nucleic acids to measure cellular DNA content. The resulting fluorescent signal can be compared to standards to determine cell number, enabling fast and sensitive microplate assays to measure cell proliferation and cytotoxicity.

Le test consiste en une sonde fluorescente rouge de liaison à l’ADN perméable aux cellules et un suppresseur de fond imperméable aux cellules. La sonde et le suppresseur sont mélangés et ajoutés aux cellules ; la sonde colore toutes les cellules, tandis que le suppresseur pénètre uniquement dans les cellules mortes ou les cellules dont les membranes cellulaires sont compromises, supprimant la fluorescence de la sonde à ces endroits. En conséquence, seules les cellules saines sont détectées.

Les caractéristiques des tests de prolifération cellulaire rouges CyQUANT Direct comprennent :

• Pratique—pas de lavages, de lyse cellulaire ou d’équilibrage de température ; il suffit d’ajouter et de lire pour détecter les changements dans la prolifération des cellules adhérentes et en suspension
• Précis―basé sur la quantité d’ADN cellulaire, qui est hautement régulée et indépendante de l’état métabolique des cellules
• Fiable―la sonde fluorescente rouge optimisée et le suppresseur de fond donnent un test très sensible avec une large plage dynamique
• Stable―stabilité du signal fluorescent rouge pendant sept heures, idéale pour les grands tests de dépistage
• Multiplex activé―peut être combiné avec des lectures fluorescentes ou luminescentes spectralement distinctes

Le test CyQUANT Direct est un test de prolifération et de cytotoxicité basé sur la fluorescence rouge pour les lecteurs de microplaques avec une plage de détection linéaire de moins de 100 à 20 000 cellules par puits pour la plupart des types de cellules. Le test sans lavage, add-mix-read peut être effectué en une heure. L’excitation fluorescente rouge et les longueurs d’onde d’émission offrent un test idéal pour le multiplexage avec des colorants ou des protéines fluorescentes vertes. De plus, le signal fluorescent est stable pendant plusieurs heures, pour apporter une une commodité supplémentaire au flux de travail.

Étant donné que la quantité d’ADN dans les cellules est hautement réglementée, les méthodes de détection basées sur la détermination de la quantité d’ADN sont très précises. Le test de prolifération cellulaire rouge CyQUANT Direct se compose d’une sonde de liaison à l’ADN perméable aux cellules fluorescentes rouges et d’un colorant suppresseur de fond. La sonde et le suppresseur sont mélangés, ajoutés aux cellules, incubés pendant une heure, puis la fluorescence est mesurée. La sonde pénètre dans toutes les cellules, mais le suppresseur ne pénètre que dans les cellules mortes ou les cellules dont les membranes sont fragilisées. En entrant dans des cellules mortes et mourantes, le colorant suppresseur de fond supprime le signal de la sonde fluorescente, ce qui entraîne la détection uniquement des cellules saines. Ainsi, le test de prolifération cellulaire rouge CyQUANT Direct peut être utilisé pour mesurer les changements de prolifération ainsi que la cytotoxicité.