Applied Biosystems™ Dosage PureQuant™ Treg

Description

Les dosages sont basés sur qPCR TaqMan et mesurent la méthylation d’ADN génomique à des sites spécifiques qui servent d’identificateur unique. Les dosages comprennent des étalons et des contrôles et chaque plaque à 96 puits peut recevoir jusqu’à sept échantillons de test. Les résultats sont fournis en pourcentage du type de cellule cible par rapport aux cellules d’entrée totales à l’aide d’un outil d’analyse libre.

Le dosage Treg PureQuant™ utilise un site déméthylé spécifique dans le gène FOXP3 du facteur de transcription pour identifier positivement les cellules T régulatrices. Ce site spécifique permet la discrimination des cellules T régulatrices à partir de cellules T conventionnelles CD4+ FOXP3+ activées 

Parmi les nombreux avantages :

• Performances éprouvées : la technologie de base a été utilisée pour l’identification et la quantification des types de cellules immunitaires depuis plus d’une décennie
• Facilement normalisée : la méthode qPCR permet d’obtenir des résultats cohérents entre plusieurs utilisateurs, instruments et sites
• Facilite les démarches réglementaires : dossier d’assistance réglementaire fourni sur demande ; spécifications en matière de performance établies conformément à la directive ICHQ2(R1)
• Flexibilité de programmation : le dosage peut être effectué à l’aide de cellules/ADNg congelé(e)s ou frai(che)s

Les dosages comprennent tous les réactifs, étalons et contrôles nécessaires pour exécuter le dosage. Les composants spécifiques sont les suivants :

• Calibrateur : le calibrateur à base de plasmide abrite les régions génomiques cibles dans des rapports équimolaires et inclut de la GAPDH. Soumis à une conversion au bisulfite suivie d’une estimation du nombre de copies via une courbe d’étalonnage qPCR. Il permet d’estimer le facteur d’efficacité du bisulfite spécifique au dosage : le rapport entre les nombres de copies TpG/GAPDH mesurés à partir du même plasmide.
• Référence : vérifie les performances des dosages. Il comprend de l’ADN génomique extrait du sang humain de donneurs sains regroupés. Les valeurs de référence représentent la plage prévue du type de cellule cible. Par exemple, les cellules CD8+ sont généralement plus abondantes que les cellules Treg ou Th17.
• Normes : déterminer le nombre de copies inconnues. Comporte six dilutions couvrant une gamme dynamique linéaire à 4 logs (30 à 31 250 copies). Les nombres absolus de copies peuvent être déterminés de manière fiable à l’aide de la pente et de l’ordonnée des courbes d’étalonnage respectives.

Ce produit est fabriqué sur un site avec un système de gestion de la qualité certifié ISO9001.